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细胞培养相关——营养物质

发布时间:2021-04-09      点击次数:860

细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。

 
动物细胞培养

动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。

将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长,这一过程就叫传代。


植物细胞培养

植物细胞培养是在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于 液体培养基中进行震荡培养,得到分散成游离 的悬浮细胞,通过继代培养使 细胞增殖,从而获得大量细胞群体。


微生物细胞培养

微生物培养所培养的微生物通常是病菌、细菌、放线菌、真菌等。微生物多为单细胞生物,野生生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂,因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度,而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻,玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。


培养条件

  1. 无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
  2. 营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)
  3. 血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)
  4. 温度和pH(5±0.5℃,7.2~7.4)
  5. 气体环境(95%的空气+5%CO₂的混合气体)

 
离体培养细胞与体内细胞在营养要求上的主要差别:
·体外长期培养的细胞大多需要血浆、血清或胚胎浸出液。
·在体内血液中许多活性很强的物质只需微量即可维持营养的需要,而在体外培养时无法观测,量多了可能与微量的作用不同,量少了又可能很快就被消耗掉。
·培养细胞是一群离体细胞,而这些细胞有不同的营养要求。这些不同的营养要求在体内由其他器官和组织细胞的活动间接供给,而在培养基中则没有这种供给,也不受其他组织代谢的影响。
·各种组织都有其特殊的营养要求,能适合某一种组织的培养基,不一定就能适合别一种组织的细胞,其差异有时较大。
·在体内的细胞,其新生与衰亡维持一种平衡,而在体外培养时,细胞增殖,体积加大,增殖速度往往高于分化速度,新生细胞比衰亡细胞生长要快,所以营养要求更高。


由此可见,各种不同的细胞具有不同的营养要求。因此,细胞营养的研究在组织细胞培养中非常重要。凡能进入细胞中被细胞所利用,参与细胞代谢活动和维持细胞生存的物质均属营养物质。体外培养细胞的生长所需的基本营养物质,除糖类、氨基酸和脂类三大类营养物质外,也需要一定量的无机盐、维生素和微量元素等。为防止污染,培养基中还需添加一定量的抗生素。

 
细胞培养中的营养物质

一切营养物质只有溶于水,才易被细胞吸收。代谢产物也需溶于水才能排泄。水还便于溶质物质的转移。水作为一种导热体,对生物体内环境温度的调节起重要作用。水中有溶解氧的存在,可供细胞呼吸,可维持水中有机体的生存。细胞培养用水必须经过2~3次玻璃器皿蒸镏或者用离子交换树脂处理。这样的水含杂质少、纯度高,应用起来安全可靠。

细胞靠糖的氧化来获得能量。葡萄糖是机体活动能量的主要来源。故在培养基中应加入一定浓度的葡萄糖( 1g/100ml),以在生物氧化后供给细胞大量的能量。近年证明谷氨酰胺也是碳的重要来源.葡萄糖的作用与平均细胞容积有直接的关系,而与细胞数的变化关系较小。很多健康胚胎细胞和成体细胞,皆依赖无氧酵解来获得能量,有些细胞也可以经脱氨获得基本能量。

  • 氨基酸

氨基酸是组成蛋白质的基本单位。所有培养细胞需要以下12种基本氨基酸:
精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、苏氨酸、缬氨酸、胱氨酸及酪氨酸。另外尚须谷氨酰胺。

  • 维生素

维生素是人类及动物细胞维持生命和生长所需的一种活性物质。许多维生素是酶的辅酶和辅基的组成部分,对细胞的代谢有重大的影响,某些维生素缺乏,短期可引起细胞死亡。

  • 无机离子和微量元素

钠、钾、镁、钙、磷、氮等无机离子是细胞生长所必需的,它们参与细胞的代谢,是细胞组成所需要的。此外,微量元素铁、锌、硒等也是细胞生长需要的。细胞培养时用的平衡盐溶液主要含钠、钾、钙、镁等阳离子。

  • 血清

血清中含有多种促进细胞生长因子,是体外培养细胞所需生长因子的重要来源。

  • 促细胞生长因子

体外培养细胞除需要上述营养成分外,同样需要促进细胞生长的激素类物质,尤其是促细胞生长因子。如胰岛素能促使细胞利用葡萄糖和氨基酸,有促进有丝分裂作用,对很多细胞的增殖生长均有促进作用。氢化可的song对皮肤上皮细胞及乳腺上皮细胞增殖生长有很好的促进作用,还能提高神经胶质细胞和成纤维细胞的克隆形成率。

 
细胞培养的应用

  1. 直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究.
  2. 直接观察细胞的变化可便于摄影。
  3. 研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。
  4. 便于使用各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。
  5. 是分子生物学和基因工程学的研究对象,也是其主要的组成部分。
  6. 易于施用物理、化学生物的实验研究。
  7. 易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。
  8. 成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。


营养物质:

货号名称规格
abs9379脑心浸液琼脂(BHI)250g
abs9378脑心浸液肉汤250g
abs47014866酵母膏500g
abs47014867胰蛋白胨500g
abs42219719琼脂粉500g
abs47050765葡萄糖5kg
abs42013254磷酸氢二铵100g/500g


氨基酸:

货号名称规格
abs45126251DL-蛋氨酸100g/500g
abs42020716L-赖氨酸100g/500g
abs45156824L-苯丙氨酸100g/500g
abs42152262L-色氨酸25/100g/250g
abs45156854L-缬氨酸25/100g/500g
abs44064065L-胱氨酸100g/500g
abs45156847L-酪氨酸100g/500g


维生素:

货号名称规格
abs42088615Vitamin A100mg/1g
abs42237431Vitamin B15g/25g
abs47001114vitamin B620mg
abs42157283Vitamin B121g/5g
abs42020367L-Ascorbic Acid500g
abs42029319Vitamin D21g/5g
abs47018967Vitamin E20mg
abs42088618Vitamin K11g/5g
abs42157289Vitamin K425g


血清:

货号名称规格
abs973胎牛血清(优级),辐照125ml/500ml
abs982BHK细胞新生牛血清(优级)125ml/500ml
abs981BHK细胞新生牛血清(特级)125ml/500ml
abs988CHO细胞新生牛血清(优级)125ml/500ml
abs987CHO细胞新生牛血清(特级)125ml/500ml
abs984Vero细胞新生牛血清(优级)125ml/500ml
abs983Vero细胞新生牛血清(特级)125ml/500ml
abs986二倍体细胞新生牛血清(优级)125ml/500ml
abs985二倍体细胞新生牛血清(特级)125ml/500ml
abs989马血清(优级)125ml/500ml


抗生素:

货号名称规格
abs9246青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液(100×三抗)100ml
abs9245青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)100ml
abs9244青霉素-链霉素溶液(100×双抗)100ml
abs47047771Carbenicillin disodium salt25g/100g
abs47014828Hygromycin B1g/5g/10g
abs42083989Penicillin G sodium salt1g/25g


消化酶:

货号名称规格
abs44071510Pancreatin50g/250g/1kg
abs47014937Trypsin (0.25%), Phenol Red100ml
abs47014940Trypsin, TPCK Treated100mg/500mg
abs47014938Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol Red100ml
abs47047375Trypsin-EDTA(0.25%) ,不含酚红100ml


其他辅助产品:

货号名称规格
abs44059881MCDB 131(不含L-谷氨酰胺)500ml
abs42155907Poly-L-Lysine Solution100ml
abs04429Recombinant Human Fibronectin  Fragment/NovoNectin10μg/50μg/500μg
abs04456Recombinant Human  Serotransferrin/Transferrin (C-6His)10μg/50μg/500μg
abs44077956Recombinant Human Transferrin100mg/1g/10g
abs9361多聚L-赖氨酸25mg/100mg
abs9187二甲基亚砜(DMSO)(细胞培养级)50ml
abs9413无血清细胞冻存液(治疗级)100ml
abs9253支原体清除试剂20mg/100mg
abs9254支原体清除试剂Plus10mg


耗材:

货号名称
abs7009100um细胞过滤器(160目,黄色)
abs700740um细胞过滤器(300目,紫色)
abs700870um细胞过滤器(200目,白色)
abs7034标准透明12孔细胞培养板
abs7035标准透明24孔细胞培养板
abs7040标准透明48孔细胞培养板
abs7033标准透明6孔细胞培养板
abs7037标准透明96孔U型底细胞培养板
abs7036标准透明96孔细胞培养板
abs7014175cm²细胞培养瓶(600ml,密封盖)
abs7015175cm²细胞培养瓶(600ml,透气盖)
abs701025cm²细胞培养瓶(50ml,密封盖)
abs701125cm²细胞培养瓶(50ml,透气盖)
abs701275cm²细胞培养瓶(250ml,密封盖)
abs701375cm²细胞培养瓶(250ml,透气盖)

 

Absin特色产品线(全部现货):
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

 

爱必信(上海)生物科技有限公司
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