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有必要对血清进行热灭活吗?

发布时间:2020-06-22      点击次数:931
 
  血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响,下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。
  清热灭活操作步骤:
  ①选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。
  ②对照瓶内放入与血清等体积的水。
  ③温度预试。对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃。
  ④血清灭活。血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,定时30分钟。
  ⑤大瓶血清灭活后,进行分装。
  ⑥保存。分装后,抽样做无菌试验,-20~-70℃保存。
  多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。我们建议,对于那些对血清进行灭活的用户,需要通过试验来证实其必要性,确定灭活的适当条件;在灭活过程中,需要严格认真监测,并选择一个可重复的方案进行操作。
  
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