浅析牛垂体提取物的作用与意义所在

    牛垂体提取物是由牛脑垂体制备的提取物，有研究表明BPE具有明显改善人垂体腺瘤细胞体外无血清培养条件的作用，对离体培养的垂体腺瘤细胞增殖具有促进作用。常用作无血清细胞培养的生长补充剂，可促进上皮细胞、内皮细胞和黑色素细胞增殖，广泛用作各种上皮细胞和黑色素细胞培养中的补充剂。此外，其具有抗氧化能力，可对抗过氧化氢诱导的细胞坏死，蛋白质氧化，膜破碎和DNA损伤。BPE是无血清的促有丝分裂添加剂，含有天然生长因子的*混合物，可与MCDB系列（MCDB170或MSDB154）或DMEM / Ham's F12的基础培养基组合使用。能刺激人支气管h皮细胞的生 氢化可的松对支气管卜皮细胞及肺癌细胞的 长。’“但牛垂体提取物对肿瘤细胞生长的作生长均有刺激作用。Invitrogen,DMEM/F12培养基为Gibico产品,L-谷氨酰胺、胎牛血清和丙酮酸钠为国产,一抗为小鼠抗人角蛋白8/18型单克隆抗体，配制，即在DMEM/F12中加入终浓度分别为10μg/mL INS、0·1μg/mL HC。mmol/L谷氨酰胺、100 IU/mL青霉素、100μg/mL链霉素、50 IU/mL两性霉素B及10 IU/mL庆大霉素,为无血清培养液。*培养基配制。基础培养基中按需加入10μg/mL TF、20 ng/mL T3、25 ng/mL EGF、牛垂体提取物及5%~10%血清。1·1·4主要仪器400目铁网滤筛、25 cm2塑料培养瓶(Costar),24孔细胞培养板,6孔细胞培养板,94 mm细胞培养皿,普通离心机,超净工作台,血球计数板,混合纤维脂微孔滤膜(0·22、0·45μm),滤器,针头式滤器。对于单层中上皮细胞的生长，推荐浓度为35〜70ug / ml BPE。通过使用优化的基础培养基如MCDB170或MCDB154，浓度可以降低。确定BPE浓度的有效方法是在选择的细胞上进行简单的生长测定。建议将产品分装成单次使用体积，以避免反复冻融所引起的可能活性损失。