全国服务咨询热线:

article技术文章
首页 > 技术文章 > Forskolin的功能与作用

Forskolin的功能与作用

更新时间:2018-04-10      点击次数:11642
  Forskolin在不与细胞表面受体相互作用前提下刺激腺苷酸环化酶活性。在脂肪细胞中Forskolin's促进 cAMP产生进而可以抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒作用以及组胺释放,降低血压、眼内压,抑制血小板聚集,促进血管舒张,支气管扩张和甲状腺激素分泌,刺激脂肪分解。Forskolin 抑制血小板活化因子 (PAF)的结合, 这种抑制不依赖于cAMP形成可能是 Forskolin直接作用于 PAF或者通过干扰PAF与它的受体结合实现的,似乎对多种膜转运蛋白也有效果并且可以抑制脂肪细胞,红细胞,血小板,和其他细胞中的葡萄糖运输。Forskolin也被用于治疗青光眼
 
  Forskolin可以使膜,细胞或组织制备液中cAMP含量上升。Forskolin 不仅可以活化AC 而且可以与某些其它蛋白相互作用,包括葡萄糖转运蛋白和离子通道。Forskolin能够促进9种不同独立AC形式的活化,虽然对AC9效率有点低,这可以用于提供一种鉴定和量化G蛋白 (Gs)–AC复合物高亲和性结合位点的方法。G蛋白偶联受体活化G蛋白有助于细胞中Forskolin刺激的cAMP 产生,因为 G蛋白-Forskolin对AC活性有增强作用。
 
  Forskolin的细胞内浓度由两个细胞膜上的酶调节,促进 ATP 合成 cAMP, 而磷酸二酯酶把 cAMP 降解成 AMP。cAMP 的激活是由不同的 GTP 结合蛋白偶联受体受体(GPCR)和 GTP 结合蛋白(Gs 或者 Gi)相互 作用而调节。蛋白是由 Gα (i 或者 s) 、Gβ 和 Gr 组成的异源三聚体GPCR 激动剂使 GTP 和 Gα 结合,产生构象变化,导致 Gα 与 Gβ γ 分离.分离后,Gα s 主要与 AC 激活有关,而 G α i 则是抑制 AC 活性。测量胞内 cAMP 是检测化合物对 GPCR 介导的 AC 活性的激活或者抑 制作用的理想方法。细胞制备,细胞长到 70%的时候, 用不含钙和镁离子的 PBS 洗一次, 然后用 5mM EDTA(PBS 配制成的)37 度消化 5min,275g 离心 10min.HBSS 1X 重悬,计数,275g 离心 5min.用 stimulation buffer 重悬细胞,按 6*105 个/ml 的浓度稀释细胞(3000/孔) 分析步骤 1 Gα s 受体分析 cAMP 标曲 Gα i 受体分析 cAMP 标曲 目的 确定 cAMP 分析的敏感性 (IC50 值)和动态范围 (IC10-IC90) 。确定zui大分析窗的*细胞 浓度,对于 Gα i 分析,确定 Forskolin 的 EC90 以用于激动 剂分析。
 
爱必信(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:info@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息