中性粒细胞呼吸爆发定量检测试剂盒简介

更新时间：2017-03-30 点击次数：2894

中性粒细胞（PMNs）的吞噬作用在抵御细菌、真菌等病原微生物感染过程中发挥重要作用。吞噬作用过程包括几个主要阶段：趋化，黏附，内吞，胞内氧依赖性（呼吸爆发）和氧非依赖性的杀伤。正常条件下细菌感染后，机体PMNs被激活，PMNs吞噬和氧化功能增强是机体重要的天然免疫防御机制。因此通过观察PMNs的活化状态可以帮助了解机体细菌感染的状况。

爱必信（Absin）提供的试剂盒采用流式细胞仪（FMC）检测PMNs功能，用PMA作为刺激剂，以二氢若丹明作为荧光底物。中性粒细胞受刺激后产生反应性氧化物，氧化二氢若丹明为可发出荧光的若丹明123。这个反应可以由溶血素终止。产生的反应性氧化物可以用荧光强度来表示。PMNs活化和机体的天然免疫能力。可用于研究在各种病理情况下如感染、自身免疫疾病、应急、肿瘤、手术等中中性粒细胞的功能改变及药物的效果评价。该试剂盒不仅用于人，还可以用于小鼠、大鼠、兔、狗、牛等其他种属。

操作步骤：

1. 无菌肝素抗凝的全血50ul，加刺激剂（如PMA）50ul, 37°C 孵育15分钟。

2．加二氢若丹明25ul, 37°C避光孵育5分钟

3．溶血素用无菌去离子水1：10稀释，加稀释后的溶血素1ml ，室温避光溶血15分钟

4．PBS洗涤2次,1500rpm离心5分钟，去上清液

5．加0.5mlPBS重悬细胞，上流式细胞仪检测

实验结果示例图：