Western Blot实验问答集锦之蛋白marker篇
更新时间：2017-03-01 点击次数：5601
Western Blot （WB）即蛋白免疫印迹实验。是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB是进行蛋白质分析zui流行和成熟的技术之一。本篇讨论Western Blot实验中关于蛋白marker的常见问题分析，有助于成功完成WB。
1.蛋白marker为什么跑的条带不清楚？
答：首先确认胶的浓度、PH值，离子强度是不是正常，这些都会影响条带的质量。其次确定电泳液的PH、离子强度是否正确，如甘氨酸浓度太低时，蛋白会浓缩不好；电泳液新鲜配制。
2.为什么蛋白marker总是跑得比其他样品慢？
答：你的蛋白marker跑得比其他指示剂慢，可能只是因为他们的电泳速度不一样，不是一个公司生产的，选择爱必信一篮子采购就可以避免这样的问题了。
3.为什么转膜时marker不清楚？
答：在western Blot过程中，蛋白Marker就像个螺丝钉一样虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。
4.怎么制作蛋白marker？
答：少年，你能提出这个问题是很有前途的。蛋白marker制作复杂，爱必信有现成的，*，实验效果*，拿好不谢！
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