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胶原酶 Ⅳ型

简要描述：abs47048003胶原酶 Ⅳ型是一种蛋白水解酶，常用来消化细胞外基质蛋白。作为一种肽链内切酶，胶原酶特异性识别Pro-X-Gly-Pro序列（高频出现在胶原collagen，很少在其他蛋白中发现）并切割氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。

  • 产品型号：abs47048003
  • 厂商性质：生产厂家
  • 更新时间：2023-03-30
  • 访  问  量：367
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品牌自营品牌供货周期现货
应用领域化工,生物产业,能源
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描述

    胶原酶（Collagenase）是一种蛋白水解酶，常用来消化细胞外基质蛋白。作为一种肽链内切酶，胶原酶特异性识别Pro-X-Gly-Pro序列（高频出现在胶原collagen，很少在其他蛋白中发现）并切割氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。不同于其他蛋白酶，胶原酶是一种可识别并降解具三股超螺旋结构的天然胶原纤维，这种胶原纤维广泛存在结缔组织。

    胶原酶来源于溶组织梭菌（Clostridiumhistolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有梭菌蛋白酶A（Clostridiopeptidase A），能够降解天然胶原和网状纤维；还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别用以水解存在结蹄组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质等。目前商业化的胶原酶因所含组分的差异分为五类，其在应用上具有一定区分。

    本品是IV型胶原酶，活性≥160 CDU/mg冻干物，含较低的胰酶活性以降低对膜蛋白和受体的损害，通常用于胰岛细胞制备，和维持受体完整性比较重要的其他研究。也可用于髓系细胞制备。
来源
胶原酶 Ⅳ型 溶组织梭菌
纯度
活性≥160 CDU/mg
使用方法
胶原酶 Ⅳ型 使用方法： 一、储存液制备： 1、直接往100mg胶原酶内加入100µl含钙镁的HBSS缓冲液，轻轻漩涡震荡确保*溶解混匀。 2、根据具体批次的酶活力，用含钙镁的HBSS缓冲液调整酶浓度到100U/µl（1000×储存液），之后用低蛋白吸附滤膜过滤除菌。 3、立即使用或将储存液根据单次用量分装，置于-20℃避光保存。 4、使用前置于冰上融化，避免反复冻融。建议胶原酶的工作浓度范围50-200U/ml（或0.5-2.5mg/ml），具体使用浓度请根据具体消化对象或参考文献来调整。 二、组织分离： 1、用无菌刀或剪刀将组织切成3-4mm小片，之后用含钙镁的HBSS缓冲液清洗组织片几次； 2、加足量含钙镁的HBSS缓冲液浸没组织片，之后按照50-200U/ml用量加入适量胶原酶； 3、37℃孵育4-18h，置于水平摇床并且孵育体系加入3mM CaCl2可提高消化效率。 4、将消化好的细胞混合物用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。 5、将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。 6、低速离心，吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞，使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。 三、器官灌注： 1、将胶原酶加入37℃预热含钙镁的HBSS缓冲液，使其浓度为50-200U/ml，或根据具体实验体系调整；另加入3mM CaCl2可提高消化效率。 2、按照针对特定器官的预优化频率来进行灌注； 3、将收集到的细胞/组织混合碎片用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。 4、将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。 5、低速离心，吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞，使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。
储存/保存方法
2-8℃干燥保存，可置于-20℃长期保存，2年有效。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
基本信息
外观
棕褐色或淡褐色粉末
温馨提示：本产品仅作科研实验使用，不支持临床等研究


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